ดังคำกล่าวที่ว่า หากคนงานต้องการทำงานให้ดี เขาต้องลับเครื่องมือให้คมก่อน การเลือกวัสดุสิ้นเปลืองมีความสำคัญมากเพื่อให้ได้ผลการทดลอง PCR ที่น่าพอใจ เมื่อวิเคราะห์ผล PCR เรามักมุ่งเน้นไปที่การวิเคราะห์ไพรเมอร์ ความเข้มข้นของเอนไซม์ อุณหภูมิ และเวลา แต่ไม่สนใจว่าวัสดุสิ้นเปลือง PCR ก็เป็นหนึ่งในปัจจัยที่มีอิทธิพลเช่นกัน วัสดุสิ้นเปลือง PCR มีหลายประเภท จะเลือกวัสดุสิ้นเปลือง PCR ที่เหมาะสมได้อย่างไร ต่อไปนี้เป็นคำถามสองสามข้อที่จะช่วยคุณหาคำตอบ
วัสดุสิ้นเปลือง PCR
1. เหตุใดวัสดุสิ้นเปลือง PCR จึงทำจาก PP
ไม่ว่าจะเป็น PCR ธรรมดาหรือ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงตามเวลาจริง (qPCR) โดยปกติแล้ววัสดุสิ้นเปลืองจะสัมผัสโดยตรงกับรีเอเจนต์หรือตัวอย่าง ดังนั้นวัสดุคุณภาพสูงและเทคนิคการประมวลผลที่ดีจึงเป็นสิ่งจำเป็นในกระบวนการผลิตและการเตรียมการ วัสดุสิ้นเปลืองทั่วไปทำจากโพลีโพรพีลีน (PP) โพลิโพรพิลีน (PP) เป็นวัสดุที่เฉื่อยทางชีวภาพ พื้นผิวไม่ยึดติดกับสารชีวโมเลกุลได้ง่าย และมีความทนทานต่อสารเคมีและอุณหภูมิที่ดี
2. วิธีเลือกหลอด/แผ่น PCR ที่มีปริมาตรต่างกัน
ปริมาตรทั่วไปสำหรับหลอด/แผ่น PCR:
• หลอดเดียว/{{0}}หลอด/12-หลอด: 0.5mL, 0.2mL, 0.1mL
• {{0}}แผ่นหลุม: 0.2mL, 0.1mL
• {{0}}จานหลุม: 0.02mL
ข้อมูลจำเพาะสำหรับท่อ/แผ่น PCR:
เลือกผลิตภัณฑ์ที่เหมาะสมตามข้อกำหนดการทดลองเฉพาะ ปริมาตรของหลอด PCR ส่วนใหญ่สามารถตอบสนองความต้องการของปฏิกิริยา PCR ข้อกำหนดด้านความจุมีทั้งแบบความจุมาตรฐานและความจุต่ำ โดยทั่วไป แนะนำให้เลือกหลอดความจุต่ำก่อน เนื่องจากท่อ/แผ่นเครื่องปฏิกรณ์ปริมาตรต่ำมีพื้นที่ด้านบนน้อย การถ่ายเทความร้อนจึงดีขึ้นและการระเหยจึงลดลง ในเวลาเดียวกัน จำเป็นต้องหลีกเลี่ยงการเพิ่มตัวอย่างมากเกินไปหรือน้อยเกินไปเมื่อเพิ่มตัวอย่าง มากเกินไปอาจทำให้การนำความร้อนลดลง การรั่วไหล และการปนเปื้อนข้าม ในขณะที่น้อยเกินไปอาจทำให้ตัวอย่างสูญเสียการระเหยได้
3. ท่อเดี่ยวหรือท่อแถว 8-แบบครอบแบน/ท่อนูนแตกต่างกันอย่างไร
เมื่อปริมาณตัวอย่างมีขนาดเล็ก แนะนำให้ใช้หลอดเดี่ยวหรือหลอด {{0}}หลอด อย่างไรก็ตาม เมื่อความต้องการปริมาตรของปฏิกิริยามีขนาดใหญ่ หลอดเดี่ยวจะเหนือกว่า และปริมาตรอาจสูงถึง 0.5 มล. มี 2 ประเภทคือท่อเดี่ยวและท่อ 8-ท่อที่มีฝาแบนและท่อนูน ซึ่งแต่ละประเภทมีข้อดีของตัวเอง ฝาแบนให้การส่งสัญญาณฟลูออเรสเซนต์ที่แม่นยำสำหรับ qPCR; ง่ายต่อการเขียนบนเครื่องหมาย ฝาครอบนูนสัมผัสกับฝาครอบเครื่องมือ PCR เพื่อลดการเสียรูปของท่อที่เกิดจากแรงดัน อย่างไรก็ตาม จะส่งผลต่อการส่งสัญญาณฟลูออเรสเซนต์และไม่สามารถใช้กับการทดลอง qPCR ได้
4. อะไรคือความแตกต่างในสถานการณ์การใช้งานของเพลต 96-หลุมที่แตกต่างกัน
96-โดยทั่วไปแล้ว จานหลุมจะแบ่งออกเป็นจานที่ไม่มีขอบ จานกึ่งขอบ และจานที่มีขอบเต็ม
แผ่นไร้กระโปรง: ใช้งานได้กับเครื่องระบายความร้อนหรือเครื่อง qPCR ส่วนใหญ่ แต่ไม่เหมาะสำหรับการใช้งานอัตโนมัติ ความเสถียรไม่สูงในระหว่างกระบวนการปิเปต และจำเป็นต้องใช้กับตัวยึดเพลต
แผ่นเพลทกึ่งกระโปรง: สามารถปรับใช้กับฉลากหรือติดบาร์โค้ด และการใช้งานอัตโนมัติ และมีความเสถียรในการปิเปตที่ดี
แผ่นขอบเต็ม: เหมาะมากสำหรับการใช้งานในห้องปฏิบัติการอัตโนมัติ แต่ยังเหมาะสำหรับการใช้งานฉลากและบาร์โค้ด มีความแข็งแรงเชิงกลที่ดี เหมาะสำหรับเครื่อง PCR ที่มีโมดูลยื่นออกมา และมีความเสถียรสูงระหว่างการปิเปต
5. วัสดุเพลท/ท่อ PCR หนาและเสถียรกว่าหรือไม่?
เลขที่. วัสดุสิ้นเปลือง PCR ต้องมีความหนาของผนังสม่ำเสมอ เพื่อให้การถ่ายเทความร้อนสม่ำเสมอ ผนังท่อที่บางเฉียบนั้นบางกว่ารุ่นมาตรฐานถึง 50 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งสามารถลดอุปสรรคด้านความร้อนลงได้อีก ทำให้ตอบสนองได้เร็วและดีขึ้น
6. สำหรับจานหลุม 96-หรือ 384-หลุม ทำไมมุมตัดและฉลากถึงไม่เหมือนกัน
การตัดมุม: การเลือกตำแหน่งการตัดมุมของเพลต PCR ขึ้นอยู่กับข้อกำหนดของเครื่องมือที่ดัดแปลงเพื่อให้จัดตำแหน่งได้ง่าย
การระบุ: การทำเครื่องหมายด้วยตัวอักษรและตัวเลขบนเพลต PCR ช่วยระบุหลุมเจาะแต่ละหลุมและตำแหน่งของตัวอย่าง โดยทั่วไปจะเป็นโลโก้ตัวเลขสีนูนหรือโลโก้สลัก สำหรับการทดสอบการใช้งานอัตโนมัติบางอย่าง แผ่นปฏิกิริยาที่มีเครื่องหมายประทับจะถูกปิดผนึกให้ดีขึ้น
7. หลุมเพลต PCR บางหลุมยื่นออกมา ในขณะที่หลุมอื่นๆ แบนราบ อันไหนดีกว่า?
อะไรเหมาะก็ดี แผ่น PCR ทั่วไปมีสองประเภท: ขอบหลุมแบนและขอบหลุมยก แผ่นปฏิกิริยาที่มีขอบหลุมแบน เหมาะสำหรับนักปั่นความร้อนส่วนใหญ่ แผ่นปฏิกิริยาที่ขอบของรู Riser นั้นสะดวกสำหรับการซีล ซึ่งสามารถลดความเสี่ยงของการปนเปื้อนข้ามระหว่างตัวอย่างได้
8. วิธีการเลือกหลอด/แผ่น PCR ที่มีสีต่างกัน?
สำหรับปฏิกิริยา PCR ทั่วไป สามารถใช้แบบโปร่งใสได้ ในปฏิกิริยา PCR แบบเรียลไทม์ ความไวและความสม่ำเสมอของหลอดสีขาวจะค่อนข้างสูงกว่า ผนังท่อสีขาวป้องกันไม่ให้สารเรืองแสงผ่านผนังท่อและการหักเหของแสง จึงป้องกันไม่ให้สารเรืองแสงส่งผ่านไปยังโมดูลทำความร้อน ถูกดูดซับโดยโมดูล หรือสะท้อนแสงไม่สม่ำเสมอ เมื่อเปรียบเทียบกับหลอดโปร่งใส สัญญาณฟลูออเรสเซนซ์ที่เข้มข้นและเข้มข้นกว่าสามารถรวบรวมได้ที่ด้านบนของหลอดสีขาว
