การสร้างเซลล์เกี่ยวข้องกับขั้นตอนของการฉีดเซลล์ การสร้างรูปร่าง และการได้มา เซลล์ในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์จะต้องเติบโตและพัฒนาในระดับหนึ่ง ในขณะนี้จำเป็นต้องอาศัยทริปซินในการย่อยเซลล์ที่ผนังด้านนอกของขวดแล้วจึงสัมผัสได้ ในกรณีของเอนไซม์ต้องควบคุมเวลาในการย่อย
ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T75
ทริปซินจัดอยู่ในประเภทอื่นของทริปซิน ซึ่งสามารถย่อยสลายโปรตีนบนเยื่อหุ้มเซลล์ที่หลอมรวมกับขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ โดยการละลายโปรตีนในส่วนที่สอดคล้องกัน โปรตีนที่จุดเชื่อมต่อระหว่างโปรตีนจะละลาย และเซลล์จะกลายเป็นทรงกลมเนื่องจากแรงพยุงของกรอบเซลล์ของโครงสร้างภายในของมันเอง ด้วยเหตุนี้จึงเป็นการแยกเซลล์ ระดับของการย่อยทริปซินเป็นปัจจัยสำคัญในการสร้างเซลล์: การย่อยที่มากเกินไปจะเพิ่มเศษเซลล์ เศษสีดำเพิ่มขึ้น เซลล์จะหลุดออกไปโดยรวม เป็นอันตรายต่อความมีชีวิตของเซลล์อย่างร้ายแรง และบางเซลล์ลอยได้โดยมีทริปซินที่ถูกทิ้งไหลออก หากการย่อยอาหารไม่เพียงพอ จะเป็นการยากที่เซลล์จะถูกเป่าลงมาจากผนังด้านในของขวด และการเป่าและตีอย่างต่อเนื่องจะทำลายกิจกรรมของเซลล์ด้วย
ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์
ขวดสารละลายเพาะเลี้ยงโปรตีนในซีรั่ม
ในสถาบันหรือเซลล์ต่างๆ ผลของเอนไซม์ตับอ่อนไม่เหมือนกัน กิจกรรมของเซลล์ที่กระจายเอนไซม์ตับอ่อนยังสัมพันธ์กับค่าความเข้มข้น อุณหภูมิ และระยะเวลาที่มีผล เมื่อค่า pH เท่ากับ 80 และอุณหภูมิเท่ากับ 37 ระดับประสิทธิภาพของสารละลายในน้ำของเอนไซม์ตับอ่อนจะค่อนข้างแรง เมื่อใช้ทริปซิน ควรควบคุมความเข้มข้น อุณหภูมิ และระยะเวลาให้ดี เพื่อป้องกันความเสียหายของเซลล์ที่เกิดจากการย่อยอาหารมากเกินไป เนื่องจาก Ca2, Mg2 และซีรัมโปรตีน, โปรตีนกรัมลดการทำงานของตับอ่อน ดังนั้นเมื่อเตรียมสารละลายของตับอ่อน ให้ใช้ BSS ที่ไม่มี Ca2, Mg2 เช่น: สารละลาย D-Hanks เมื่อหยุดการย่อย ทริปซินสามารถหยุดได้ด้วยอาหารเลี้ยงเซลล์โปรตีนในซีรั่มหรือสารชะลอทริปซินเพื่อหยุดผลกระทบของทริปซินต่อเซลล์
ขวดวัฒนธรรม
ขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ T25
นอกจากนี้ หากเป็นเซลล์ที่ซื้อมาใหม่ คุณสามารถใช้ทริปซินที่มีความเข้มข้นต่ำกว่าเพื่อสำรวจเวลาการย่อยก่อน และสังเกตว่าเซลล์กลมทุกนาทีหรือไม่ และสร้างสถิติที่ดี สรุปแล้ว เมื่อได้รับเซลล์ในขวดเพาะเลี้ยงเซลล์ จำเป็นต้องควบคุมเวลาทริปซิไนเซชัน เพื่อรักษาความมีชีวิตของเซลล์ได้อย่างมีประสิทธิภาพ
