การใช้ขวดเซรั่ม

การใช้ขวดเซรั่ม

ขวดเซรั่มทำจากแก้วบอโรซิลิเกตสกัดต่ำ และขวดใสไม่มีสีตรงตามข้อกำหนดของ USP Type I และ ASTM E 438 Type I Standard Class A สามารถนึ่งฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 องศาเป็นเวลา 20 นาที และสามารถแบ่งออกเป็น 125 มล. , 250ml, 500ml, 1L, 2L ตามปริมาตร

ขวดเซรั่มเป็นภาชนะสำหรับเก็บเซรั่มซึ่งโดยทั่วไปทำจากวัสดุ PET โดยกระบวนการเป่ายืดแบบฉีด สื่อเป็นสารอาหารที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ ตามแหล่งที่มา มันถูกแบ่งออกเป็นสื่อสังเคราะห์และสื่อธรรมชาติ ซึ่งทั้งสองอย่างนี้สามารถเก็บไว้ในขวดเซรั่ม

ขวดเซรั่ม

สื่อธรรมชาติ:

สื่อธรรมชาติที่ใช้กันมากที่สุดคือซีรั่ม โดยทั่วไปคือซีรั่มลูกวัว เซรั่มประกอบด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตของเซลล์ ปัจจัยส่งเสริมการยึดเกาะ และสารออกฤทธิ์หลายชนิด เมื่อรวมกับสื่อสังเคราะห์ เซลล์สามารถขยายและเติบโตได้อย่างราบรื่น เซรั่มต้องเก็บไว้ในขวดเซรั่มพิเศษที่ -5 องศาถึง -20 องศา

สื่อสังเคราะห์:

สื่อสังเคราะห์ได้รับการกำหนดสูตรอย่างเคร่งครัดตามประเภทและปริมาณของสารที่เซลล์ต้องการ มีหลายประเภทและองค์ประกอบที่รู้จักซึ่งอำนวยความสะดวกในการควบคุมเงื่อนไขการทดลอง ประกอบด้วยคาร์โบไฮเดรต กรดอะมิโน ไขมัน เกลืออนินทรีย์ วิตามิน ธาตุและปัจจัยการเจริญของเซลล์ อย่างไรก็ตาม เมื่อเปรียบเทียบกับสื่อธรรมชาติแล้ว ส่วนประกอบที่ไม่รู้จักตามธรรมชาติบางอย่างไม่สามารถแทนที่ด้วยส่วนประกอบทางเคมีที่รู้จักได้ ดังนั้น สื่อสังเคราะห์พื้นฐานที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ยังต้องเพิ่มส่วนประกอบสื่อธรรมชาติจำนวนหนึ่งเพื่อเอาชนะการเพาะเลี้ยงเซลล์สังเคราะห์ ฐานไม่เพียงพอ แนวทางปฏิบัติที่พบบ่อยที่สุดคือการเพิ่มเซรั่มน่อง

ขวดเซรั่มมีรูปทรงสี่เหลี่ยม จับง่าย ทนต่อการกัดกร่อนของกรดและด่างส่วนใหญ่ อุณหภูมิการแตกตัวคือ -70 องศา และยังคงมีความเหนียวอยู่ที่ -30 องศา เป็นภาชนะบรรจุภัณฑ์ที่ดี ไม่ว่าจะเป็นอาหารเลี้ยงเชื้อตามธรรมชาติหรือวัฒนธรรมสังเคราะห์ สามารถเก็บไว้ในขวดเซรั่ม

สำหรับการแยก การเพาะเลี้ยง และการระบุเซลล์ต้นกำเนิดบุผนังหลอดเลือดจากสายสะดือของมนุษย์ และการจัดตั้งโครงยึดหลอดเลือด acellular โดยวิธีการแช่แข็งและละลายที่ดีขึ้น

เพื่อสำรวจความเป็นไปได้และมูลค่าการใช้งานทางคลินิกของเซลล์ต้นกำเนิดบุผนังหลอดเลือดที่แยกและเพาะเลี้ยงจากเลือดจากสายสะดือของมนุษย์

วิธีการ: เก็บเลือดจากสายสะดือของทารกในครรภ์ที่ได้รับการผ่าตัดคลอดครบกำหนดในภาควิชาสูติศาสตร์และนรีเวชวิทยา โรงพยาบาลในเครือแห่งแรกของวิทยาลัยการแพทย์เบงบู บรรจุในขวดซีรั่มที่มีเฮปาริน 50U/ml ภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ เก็บไว้ในกล่องน้ำแข็ง 4 องศา และขนส่งไปยังเซลล์ ในห้องเพาะเลี้ยง เซลล์โมโนนิวเคลียร์ของเลือดจากสายสะดือได้มาจากการหมุนเหวี่ยงไล่ระดับความหนาแน่น เซลล์โมโนนิวเคลียร์ที่ได้รับถูกแบ่งออกเป็นสองส่วน และตัวกลางในซีรัม M199 ของทารกในครรภ์ (FCS-M199) และสื่อกลางในซีรัม M199 แบบออโตโลกัส (AS-M199) ถูกเติมลงไป และเพาะในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีและไม่มีมนุษย์ไฟโบรเนกติน (HFN) (ทำเครื่องหมายว่า: F(0), F(1), A(0), A(1)) ตามลำดับ การเหนี่ยวนำ ในหลอดทดลอง การแยกและการขยายตัวถูกดำเนินการ

สังเกตการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของเซลล์ยึดเกาะระหว่างกระบวนการเหนี่ยวนำและการสร้างความแตกต่างทั้งหมด และระบุเซลล์จากมุมต่างๆ ที่รวมกับเทคนิคที่เกี่ยวข้อง เช่น อิมมูโนฮิสโตเคมี อิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ และโฟลว์ไซโตเมตรี

ผลลัพธ์: หลังจากเพาะเลี้ยง 12 วัน เซลล์โมโนนิวเคลียร์ของเลือดจากสายสะดือก็เริ่มเกาะติด หลังจาก 3d รูปร่างแกนเริ่มปรากฏขึ้น จากนั้นจำนวนเซลล์ที่ยึดเกาะก็ค่อยๆ เพิ่มขึ้นและค่อยๆ กลายเป็นรูปแกนหมุน เมื่อเพาะเลี้ยงนานถึงหนึ่งสัปดาห์ อาณานิคมทั่วไปจะก่อตัวขึ้นโดยมีเซลล์แกนหมุนอยู่รอบๆ และเซลล์ที่กลมอยู่ตรงกลาง เมื่อเซลล์ถูกเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 14 วัน กลุ่มเซลล์ที่เชื่อมต่อกันจะค่อยๆ เชื่อมต่อกันและก่อตัวเป็นโครงสร้างคล้ายเครือข่าย ในเวลาเดียวกัน เวลาเพาะเลี้ยงที่เพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่อง เซลล์สปินเดิลที่ยาวก็เริ่มสั้นลงทีละน้อย และแสดงให้เห็นการเปลี่ยนแปลงที่เหมือนกับหินปูทั่วไป

เซลล์ที่ยึดติดกันถูกเพาะเลี้ยงเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ และสังเกตว่าจำนวนเซลล์ในตัวกลางที่มีไฟโบรเนกตินของมนุษย์สูงกว่าที่ไม่มีไฟโบรเนกตินของมนุษย์อย่างมีนัยสำคัญ และไม่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในจำนวนเซลล์ในตัวกลางที่ต่างกันทั้งสอง #อุปกรณ์สิ้นเปลือง#